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      熒光探針pcr試劑盒的相關知識點介紹

      瀏覽次數:666發布日期:2022-07-25
        熒光探針pcr試劑盒的原理在于PCR擴增時在加入一對引物的同時加入一個特異性的熒光探針,該探針為一寡核苷酸,兩端分別標記一個報告熒光基團和一個淬滅熒光基團。探針完整時,報告基團發射的熒光信號被淬滅基團吸收;剛開始時,探針結合在DNA任意一條單鏈上;PCR擴增時,Taq酶的5’端-3’端外切酶活性將探針酶切降解,使報告熒光基團和淬滅熒光基團分離,從而熒光監測系統可接收到熒光信號,即每擴增一條DNA鏈,就有一個熒光分子形成,實現了熒光信號的累積與PCR產物形成*同步。
       
        常用于熒光免疫法中標記抗原或抗體,亦可用于微環境,如表面活性劑膠束、雙分子膜、蛋白質活性位點等處微觀特性的探測。通常要求探針的摩爾吸光系數大,熒光量子產率高;熒光發射波長處于長波且有較大的斯托克斯位移;用于免疫分析時,與抗原或抗體的結合不應影響它們的活性。
       
        目前,熒光探針pcr試劑盒的方法主要有單點測定和電荷耦合裝置(CCD)熒光成像(包括用于微區分析的激光共聚焦熒光顯微鏡成像)。由于光電倍增管點掃描時間較長,激光照射強度高,很難抓住熒光早期變化。而CCD熒光成像的面陣大,成像視野廣,成像時間可以調節,因而檢測效果比較好。
       
        化學發光檢測的特點是設備簡單、操作簡便、分析速度快及靈敏度高?;瘜W發光成像分析(CLI)是將化學發光與成像技術相結合,從而具有分辨率高、多樣品同時檢測、光譜響應范圍寬以及靈敏度高等特點。已廣泛應用于凝膠、蛋白印記及微陣列芯片中的化學發光信號檢測。
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